纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 (2012年)

纳豆激酶是一种良好的天然蛋白酶类溶栓物质。 国内外许多学者对该酶进行了基因工程研究,但在克隆表达过程中出现了许多长短不同的基因片段。 本研究通过原产日本的优质纳豆中分离鉴定出高产纳豆杆菌 N07 并提取该菌株的全基因组;通过 PCR 手段扩增出能编码纳豆激酶信号肽,前导肽和成熟肽的前纳豆激酶酶原基因 NK1,以及能编码纳豆激酶成熟肽的纳豆激酶基因 NK2,构建了纳豆激酶基因的表达载体 pET30a-NK1 和 pET30a-NK2,转化E. coli BL21 后在大肠杆菌中表达,并进行了活性分析。 结果