念珠藻Fe-SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 (2006年)

根据低等物种Fe-SOD核酸序列没计简并引物，以念珠藻基因组为模板，扩增获得了念珠藻Fe-SOD基因。将此基因重组至原核表达载体pET22b（+），构建成工程菌pET-SOD，并转化至大肠杆菌宿主。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达获得Fe-SOD蛋白分子量约为28kD。占全菌蛋白的78%，并以包涵体形式表达。经Ni2+亲和层折柱纯化后，目的蛋白的SOD比活力达1100U/mg，在紫外可见光谱中表现出金属Fe的特征峰。肿瘤细胞共培养试验表明，此Fe-SOD具有一定的抗SPC-A-1肺腺癌细胞