米根霉L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 (2006年)

文章以米根霉基因组DNA为模板，根据已公布的米根酶L-乳酸脱氢酶基因（ldnL）序列设计引物，PCR扩增得到含有ldnL的DNA片段；PCR产物T/A克隆后再双酶切，将ldnL片段连接到大肠杆菌表达载体pET17b，得到重组表达质粒pET17b-ldnL；pET17b-ldnL转化大肠杆菌BL21（DE3），摇瓶培养诱导表达后的菌体经SDS-PAGE电泳分析，结果表明克隆的ldnL基因在大肠杆菌中实现表达。