酶联免疫吸附测定(ELISA)通常用于测试牛白血病病毒(BLV)感染。 但是,在南美的市售试剂盒测试仅检测到针对gp51蛋白的抗体。 为了提高测试的灵敏度,我们在这里开发了一个两步间接双重ELISA测试,包括分别在大肠杆菌和杆状病毒表达系统中表达和产生的蛋白p24和gp51。 用我们的内部双重rp24 / rgp51 ELISA测试了通过商业琼脂凝胶免疫扩散(AGID)分析和gp51-ELISA试验相结合表示为双阳性或双阴性的210个BLV血清。 首先,我们通过棋盘技术检查了纯化,优化和标准化的蛋白质作为抗原,并建立了我们的内部ELISA测试。 板内一致性相关系数(CCC)和变异系数(CV)板内重复性水平在国际标准确定的范围内。 统计分析表明,血清值正确排名最高(93.48%),对于0.3截止值,敏感性为95.65%,特异性为91.30%。 总之,此处开发和标准化的rp24 / rgp51 ELISA具有良好的分析特性,可用于筛选BLV。