纯化大肠杆菌表达胆固醇氧化酶的两种亲和分离介质的研究 (2012年)

建立了从重组菌中高效亲和制备胆固醇氧化酶的方法，将一种源自Brevibacterium sp．(DQ345780)的胆固醇氧化酶基因转入Escherichia coil BL21(DE3)表达，选择核黄素-5′磷酸(FMN)及7-氯-异咯嗪作为亲和配体，构建胆固醇氧化酶亲和制备介质。通过两种介质的一步亲和吸附，获得纯度较高的胆固醇氧化酶样本，蛋白回收率分别为9．4％与9．9％(质量百分比)，活性回收率分别为85．2％与93．4％(活性百分比)。使用SDS-PAGE分析，纯化得到蛋白分子量为约50 000，