耐热果胶裂解酶基因pel9A的克隆和表达 (2006年)

利用PCR技术从耐热梭状芽孢杆菌（Clostridiumstercorarium）中扩增得到产耐热果胶裂解酶的结构基因pel9A，并将其克隆于表达载体pET28a中，最后将此重组质粒转化到受体茵E。coliBL-21中进行表达。诱导条件为：37℃诱导5h，IPTG浓度为0.8mm01/L。重组菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表达的蛋白质的相对分子质量为130000，与预期相对分子质量相符。细胞经超声破碎后，测得果胶酶的比酶活为15U/mg粗蛋白。