基于金属螯合亲和力固定化的甲基对硫磷水解酶的新型光学生物传感器检测有机磷农药的开发

我们已经开发了一种新型光学生物传感器设备，该设备使用通过金属螯合物亲和力固定在琼脂糖上的重组甲基对硫磷水解酶（MPH）酶来检测具有硝基苯基的有机磷（OP）化合物。 生物传感器原理基于对MPH（对硝基苯酚）催化的OP产物进行光学测量。 简而言之，MPH在其N端包含六个连续的组氨酸（6×His标签），与带有Ni离子的次氮基三乙酸（NTA）琼脂糖结合，产生了灵活固定生物React平台。 光学生物传感系统由两个发光二极管（LED）和一个光电二极管组成。 以对硝基苯酚的最大吸收波长发射光的LED用作信号光，而其他未显示吸收率的LED用作参考光。 光学传感系统检测到的吸光度与甲基对硫磷（MP）浓度呈线性相关，检测极限估计为4μM。 研究了传感器的滞后现象，结果表明，在较低的MP浓度范围内，相反过程曲线的差异很小。 由于其酶的固定简单和结构简单的设计，该系统具有发展成为适用于现场应用的实用便携式检测器的潜力。