非洲菊(Gerbera jamesonii)是园艺领域中备受关注的观赏植物,其遗传转化技术对于培育新品种具有重要意义。在基因克隆和功能研究的过程中,密码子偏好性分析是一个重要的环节,它涉及到基因在异源表达系统中的表达效率和准确性。
密码子偏好性指的是在特定生物的基因中,某些密码子出现的频率高于其他生物中相同氨基酸对应的密码子。这与生物的tRNA种类、数量以及核糖体的翻译效率等因素有关。对于非洲菊CAD(Cinnamyl alcohol dehydrogenase)基因的研究,了解其密码子偏好性能够帮助科研人员优化基因表达,提高异源表达的成功率和蛋白产量。
研究使用了转录组数据,筛选出含有完整编码序列(CDS)的CAD基因。通过密码子偏好性分析软件,如CodonW、EMBOSS、SPSS和Origin,来研究这些基因的密码子使用情况。结果表明,非洲菊CAD基因的密码子偏好性较弱,编码氨基酸时更倾向于使用A(腺嘌呤)或T(胸腺嘧啶),这反映了非洲菊基因组的特定特点。
此外,研究还发现,在非洲菊CAD基因的密码子使用中,GC1s、GC2s、GC3s、总GC含量(GC)与有效密码子数(ENC)之间没有显著的相关性。这表明,除突变压力外,其他外部因素和自然压力对氨基酸编码也有较大影响。
由于异源表达系统在表达外源基因时会受到宿主密码子偏好性的影响,因此,选择合适的表达系统至关重要。研究中预测,酵母菌的真核表达系统最适合作为非洲菊CAD基因的异源表达系统,而拟南芥(Arabidopsis thaliana)则是较为理想的受体植物。这为后续的遗传转化实验提供了理论指导。
遗传转化是研究基因功能和进行植物遗传改良的常用手段,它常常依赖于异源表达系统。然而,不同物种对密码子的偏好不同,这可能导致在异源宿主中表达时出现表达效率低或蛋白不表达的问题。因此,在进行基因克隆、功能鉴定、异源表达系统选择以及改进和优化提高基因表达水平时,对密码子偏好性进行分析显得尤为重要。
这项研究不仅提供了非洲菊CAD基因的密码子使用偏好性信息,而且还为非洲菊的遗传转化研究奠定了基础,有望推动该领域的科研和应用发展。通过深入分析植物基因的密码子偏好性,可以更加有效地进行基因工程操作,从而促进植物性状的改良和新品种的开发。