的可能性，从而降低了对受体细胞的毒性。详细比较如下：
２。1 共同点
1. 二者均为人工改造的核酸内切酶，由特异性识别靶 DNA 的识别域和非特异
性剪切 dsDNA 的切割域，他们配合着行使功能,缺一不可。
2. ＺＦＮ、ＴＡLＥＮ中的 FｏkI 是源于黄单胞杆菌的一种限制性核酸内切酶，
它只有形成二聚体时才对 dsＤNA 具有剪切活性。
3. FokI 切割 DNA 后的修复机制相同：在两个靶位点之间剪切 DNA，在 DSＢ
处诱发 DＮA 的同源重组修复机制和非同源末端连接修复机制，从而达到定
点修饰。
2．2 不同点
1. 开发时间：最早的ＺＦＮ出现在１８年前,而 TAＬＥN 技术才于 2007 年问世.
2. 靶 DNA 序列的识别：ZF 结构域识别的是三联碱基，而 TALＥN 结构域识别
的是某特定的核苷酸。例如：某蛋白包括两个锌指结构域,可识别六个碱基;
而当它包括两个 TALＥN 结构域时即两个 RVD，仅能识别两个碱基.此外，Ｔ
ＡＬEＮ的 RVD 与碱基之间的对应关系与物种、细胞、ＤＮA 序列无关,并
且设计简单,成本低,与ＺFN 相比活性更高。
3. 上下文依赖效应:ＺFN 在识别ＤＮA 序列时,重复氨基酸之间会产生相互作用,
也就是上下文依赖效应,从而使得识别的特异性发生了改变,影响基因修饰效
率.还未见 TALEN 上下文依赖效应的相关报道。
4. 对细胞的毒性效应：锌指酶切割 DNA 时易产生脱靶现象,对细胞产生了毒副
作用。TＡLEN 脱靶情况较少,毒性小。例如：通过点对点地比较二者对人细
胞内源基因 CCR5 的删除效果，发现在效率大体相同的情况下,目前实验数据
显示 TALE 所产生的细胞毒性比 ZFN 小得多。
5. 靶向基因序列长度:与 ZＦN 相比，TALEN 可以识别更长的靶基因序列。
三、存在的问题与展望
目前,ZＦN 技术还存在以下困惑:锌指蛋白结构域与 DNA 结合的特异性、亲
和性有待提高；如何让解决 ZFN 的高效导入、可调控切、瞬时表达问题;ＺFN
对细胞的潜在综合作用需进行综合评价，并对引起的潜在免疫反应,尤其是针对
