【ABO血型正、反定型操作规程】
ABO血型正、反定型是医学领域中一种至关重要的血液检测技术,旨在确保临床输血安全。这项操作规程适用于医院输血科,由具备专业技术的工作人员执行,他们对每一个样本的血型鉴定负全责。该过程涉及到多个环节,包括试剂的采购、保存和使用,设备的管理和消毒,以及标本的采集、运输、保存和报废等。相关的记录和文件也需严格跟踪,以确保流程的合规性和可追溯性。
【实验原理】
ABO血型基于红细胞表面的凝集原(抗原)进行区分。A型血的红细胞带有A抗原,B型则带有B抗原。同时,血清中存在对应的凝集素(抗体)。当A抗原遇到抗A凝集素或B抗原遇到抗B凝集素时,会导致红细胞发生凝集反应。通过正定型,即用标准血清中的凝集素与被测试者的红细胞反应,反定型则是用标准红细胞与被测试者的血清反应,从而确定个体的ABO血型。A型血清含有抗B凝集素,B型血清含抗A凝集素,以此进行相互验证。
【所需仪器和试剂】
完成ABO血型正、反定型需要以下设备:玻璃试管、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、普通离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱和标本保存冰箱。所使用的试剂包括抗A标准血清、抗B标准血清、A型标准红细胞、B型标准红细胞、O型标准红细胞和生理盐水,所有试剂都必须是具有合格证书的正品。
【标本收集与处理】
1. 受检者血清:采集2-3毫升静脉血,经过1000转/分钟离心1分钟或室温静置1小时后,提取上清。
2. 2-5%的受检者红细胞:采用静脉血或末梢血,用生理盐水配成2-5%红细胞盐水悬浮液,备用。
3. 如标本出现中度以上溶血,则视为不合格,不得用于检测。
【实验方法与步骤】
1. ABO血型的正定型(试管法):
- 在2支试管上分别标记抗A和抗B。
- 制备待测标本的2-5%红细胞悬浮液。
- 向抗A管中加入抗A标准血清,抗B管中加入抗B标准血清。
- 在两管中分别加入待测标本的红细胞悬浮液。
- 混合后,置于离心机离心,或室温静置,然后观察是否有凝集现象,若未见凝集,需在显微镜下进一步检查。
2. 结果判断:根据凝集情况判断血型,凝集强度的观察有助于识别A、B亚型和类孟买型等特殊血型。
这个操作规程确保了准确的ABO血型鉴定,避免了不兼容血型的输血,对于保障患者的生命安全至关重要。在实际操作中,工作人员必须严格按照规程进行,同时保持设备和环境的清洁消毒,以减少误差和交叉污染的风险。