微生物的培养与应用是生物学中一个重要的主题，尤其在高考生物复习中占据一席之地。在微生物实验室工作中，灭菌和消毒是确保实验结果准确无误的关键步骤。
1. **灭菌与消毒的区别**：灭菌是彻底杀死所有微生物，包括细胞、芽孢和孢子，而消毒仅能杀死大部分微生物，不保证杀死所有的芽孢和孢子。常见的灭菌方法有灼烧法（如接种环的灭菌）、干热灭菌法（如玻璃器皿）和高压蒸汽灭菌法（如培养基的灭菌）。
2. **微生物生长的环境条件**：硝化细菌能在缺乏碳源的环境中利用氨作为能源，因此能在无碳源的培养基中生长；破伤风杆菌在人体表皮擦伤部位能生存，但在无氧环境下才能活跃繁殖；酵母菌需要碳源和氮源以及适当的无机盐来生长，新配制的植物矿质营养液可能缺乏必要的碳源或氮源；病毒不能在灭菌后的动物细胞培养液中存活，因为它们需要活细胞才能复制。
3. **灭菌的正确理解**：灭菌是杀死所有微生物，包括芽孢和孢子。因此，选项A错误，因为它排除了芽孢和孢子。
4. **分离尿素分解菌实验分析**：A同学的结果可能由于土样差异、培养基污染或操作失误导致。没有设置对照组不会影响菌落数量，而是影响实验的可信度。
5. **获取纯净培养物的关键**：防止外来杂菌的入侵是关键，这涉及到培养基、器皿和工具的灭菌以及无菌操作技术。
6. **氯苯降解菌的筛选**：(1)固体培养基需添加琼脂；(2)培养基配制应先调pH再灭菌，以防灭菌过程中pH变化；(3)I号为通用培养基，II号为选择性培养基，硝酸铵提供氮源；(4)芽孢是微生物在恶劣环境下形成的休眠结构；(5)SP1菌在20 mg/L氯苯条件下最早停止生长，可能是由于碳源耗尽。
7. **微生物培养的误区与方法**：(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的顺序应为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板；(2)接斜面法不是常用的分离纯化方法；(3)在统计菌落数时，至少需要涂布三个平板并取平均值；(4)使用后的培养基在丢弃前应灭菌处理，以防污染环境；(5)纤维素分解菌的分离实验中，不能直接在鉴别培养基上进行选择培养；(6)分离圆褐固氮菌和酵母菌，需要利用自生固氮菌不需氮源和酵母菌不能在高浓度NaCl环境下生长的特性，分别制备无氮和高盐的培养基进行分离。
通过这些知识点的学习，学生可以掌握微生物培养的基本原则，理解灭菌和消毒的重要性，以及如何设计实验来分离和纯化特定的微生物。在实际操作中，必须严格遵守无菌操作规程，确保实验的可靠性和安全性。
