【摘 要】高效液相色谱法是一种由经典液相色谱法和气相色谱法相结合,主要对药物成分进
行分析和分离的有效方法。检测结果准确,灵敏度高,适用于大多数的有机化合物测定,常
用于多种天然药物检测分析以及鉴别等方面。本文介绍了高效液相色谱法并分析了高效液相
色谱法在药物分析方面的应用。
高效液相色谱(HPLC),是一种由经典液相色谱法和气相色谱法相结合,主要对药物成分进
行分析和分离的有效方法。相比较于经典液相色谱法,其分离药物有效成分速度、分析药物
含量速率更快,分析灵敏度更高,检测限更小;相较于气相色谱而言,其对药物分析的范围
更广,在应用上更广泛。目前高效液相色谱法主要应用于对药物有效成分的测定、有效成分
分离、含量分析以及附加成分的检测消除等方面。
在药物分析中,色谱过程是指溶质分子在互不相溶的两相(固定相和流动相)中进行的分配
过程。由于样品中不同组分在两相中的分配比不同,溶剂中各组分的展开性质也随之发生变
化,在两相中的分配发生变化,从而达到分离的目的。由于高效液相色谱法结合了气相色谱
法,利用载气携带样品分子在固定相和流动相之间不断游走分配,使有效成分得到高效分离。
经典液相色谱的填料特点决定了分析特点,即分析速度慢、分析效率和对药物有效分析成分
的敏感度低,所以它主要用于制备样品,而不是对样品进行分析。高效液相色谱法填料颗粒
更小、填料更均匀,这决定了其分离的效率更高、溶质分析传递阻力更小,也更有利于样品
的分析。目前的高效液相色谱在填料时采用新的方法,相较于早期的涂渍法,其液膜厚度更
小、柱效更高。然而随之而来的也有一系列问题:(1)由于填料颗粒更细、孔隙更小,柱
流动阻力大大增大,为了达到更好的分离效果,必须采用高压输液泵来进行输液;(2)由
于表面能的增大,对装柱技术的要求也有了很大的提高。
在本质上来看,高效液相色谱和经典液相色谱的区别不大的,二者的不同仅仅表现在药物分
析的效率和智能自动化操作上。这种差别的存在,是由于高效液相色谱的色谱柱更高效、输
液泵压力更大以及检测器灵敏度更高,这导致经典液相色谱在分析的效率、分析速度和对药
物的敏感程度度较高效液相色谱而言更低。在高效液相色谱结合自动化技术后,在应用和操
作上更加简便、在分析和处理数据上则更加精确,这使得高效液相色谱走在现代化分析领域
的前沿。
在经典液相色谱中,由于其填料颗粒大、不均匀等,其流动相无法在高压下进行输送,从而
导致其柱效较低,分析的时间较长,所以在相同时间内,高效液相色谱能够分析测定的药物
有效种类相当于经典液相色谱的 20 倍。另外一点,高效液相色谱的分析灵敏度也远非经典
液相色谱可比,其最小检测限大约是经典液相色谱的100 倍,分析种类大大增加。虽然高效
液相色谱法结合气相色谱,但由于气相色谱只能分析在固定温度下汽化却不反应的物质,所
以相较于气相色谱法,高效液相色谱的分析范围更广泛。
高效液相色谱法在化学领域应用很多,比如测定中药有效成分,分析复杂药物以及天然药物
的组成成分等方面。
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