部分还原和分步序列测定法定位虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ二硫键 (2003年)

结合部分还原和分步序列测定法确定了虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ的二硫键配对方式。在pH=3和40℃的条件下与还原剂三羧甲基磷酸（TCEP）反应10min，利用RP-HPLC分离并分别收集含有一对和两对二硫键被还原的中间体，分别与0.5mol/L碘乙酰胺溶液（pH=8.3）反应1min，使游离巯基烷基化后，测定各中间体的氨基酸序列，从而确定虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ的3对二硫键分别为Cys2-Cys17, Cys9-Cys24和Cys-Cys31(1-4, 2-5和3-6)。