为探明呼肠孤病毒(GCRV)外衣壳蛋白 VP7基因工程亚单位疫苗产生的抗体效价水平和免疫保护力,用 RT-PCR方法,从 GCRV中扩增到 VP7基因片段,并克隆至原核表达载体 pET-28a(+)中,得到重组质粒 pET-VP7,酶切鉴定后,将 pET-VP7转化到大肠杆菌 BL21(DE3)中进行诱导表达,产生的重组蛋白经变性和复性后,按0.5、 1.0、2.0 mg/尾的注射剂量分为3个免疫组,以等体积的氢氧化铝为佐剂进行注射。经 SDS-PAGE电泳分析,发 现了相对分子质量为34 000的蛋白表
