论文研究 - 新型胰蛋白酶分离胶原酶的测试

组织溶解梭状芽胞杆菌用于产生几种蛋白水解酶，例如弹性蛋白酶，中性蛋白酶，梭菌蛋白酶，尤其是胶原酶。 除了工业应用外，胶原酶对于医学目的也是必不可少的，包括分离胰岛以治疗糖尿病。 这项研究的目的是优化生产和部分纯化新型胶原酶混合物的方法，并测试其在大鼠模型中成功分离胰岛的适用性。 对溶组织梭状芽胞杆菌的细菌菌株进行测序，以确定胶原酶基因的存在。 测试了不同的发酵条件，并对胶原酶的提取过程进行了修改和优化。 采集胶原酶样品用于蛋白质印迹检测，活性评估和胰组织解离的能力。 研究结果表明，浓缩的蛋白p胰蛋白酶生长培养基最适合梭状芽胞杆菌的生长和胶原酶的产生。 全基因组测序揭示了两个胶原酶基因和一个梭菌蛋白酶基因。 蛋白质印迹特异性检测有助于选择有用的生产修饰。 经过这些修饰，还改善了完整胰岛的产量，形态和体外功能，这些胰岛最终比使用胶原酶标准混合物获得的胰岛相当或更好。 结果支持将新的胶原酶混合物用于胰岛分离，从而有机会选择替代产品。 我们的后续步骤将通过扩大生产方法的规模来扩大酶的使用范围，从而进一步纯化酶。