基于β-内酰胺酶的正向选择蛋白表达载体的构建 (2011年)

外源基因的高效克隆表达是分子生物学和生物化学研究的关键技术,在同时克隆多个基因至表达载体时的高通量操作时尤其重要,常规的基因克隆操作常常存在着很高的载体背景干扰.本研究报道了一种改进型β-内酰胺酶正向选择表达载体pPAE以及与麦芽糖结合蛋白融合的正向选择表达载体pPAE-MBP.实验证明pPAE和pPAE-MBP的克隆效率均高达100%,且目的蛋白均得到了有效的表达.pPAE和pPAE-MBP有作为常规尤其是高通量蛋白表达载体来使用的潜力.