果蝇血液发育标记基因mrj的多克隆抗体制备及检测 (2012年)

mrj是黑腹果蝇中一个蛋白编码基因.根据已报道的mrj基因序列，利用生物信息学分析选取果蝇mrj基因抗原亲水区，通过PCR扩增出其部分编码区序列，将其连接到pET-28a原核表达载体上，经酶切及测序鉴定质粒构建成功后，将重组质粒（pET-28a-mrj）转入Rosetta菌后通过IPTG（Isopropylβ-D-thiogalactoside）诱导表达出带 His标签的重组融合蛋白后用镍柱纯化.将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，并用Western Blot检测抗体的效价和特异性，