果蝇Mef2基因多克隆抗体的制备及检测 (2012年)

为了在果蝇模型中进一步研究Mef2基因的功能，制备了Mef2多克隆抗体。以果蝇eDNA文库为模板，PCR扩增出亲水性和特异性均好的果蝇Mef2基因片段，将其克隆入pET-28a原核表达载体，然后将重组质粒转化人大肠杆菌菌株Rossetea，用IPTG诱导表达融合蛋白。融合蛋白先经Ni-IDA凝胶柱纯化，再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，然后用不同浓度的抗体分别进行Western-blot实验检测抗体效价。所得结果显示获得了较高效价的果蝇Mef2多克隆抗体。