木质素合成酶CCR基因的PCR条件优化* (2007年)

以欧美杨107号为材料建立了木质素合成酶CCR基因的PCR反应优化体系，用于CCR基因片段的克隆，以CTAB法提取杨树叶片的总DNA，分别测试了模板DNA用量、dNTP浓度、DNA聚合酶量、引物浓度和退火温度对反应结果的影响。通过各单因子的组合比较，建立了PCR优化体系：20μL的PCR反应体系中含有2.0μL 10XTaq酶配套缓冲液，2.5 U Taq酶，1μL模板DNA，3.0 pmol正向及反向引物，0.75 mmol/L dNTP混合液；退火温度为50℃。