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用 Trizol 提取人骨髓总 RNA,通过 RT-PCR 扩增人干细胞因子 DNA,克隆到 pMD1 8-T载体中并测序。将其定向连入原核表达载体 pET32a(+),获得了重组表达载体 pET32a(+)/hSCF,其 cDNA 长度为 504bp,测序结果与已知序列吻合。然后在大肠杆菌 BL21 中经IPTG诱导表达,获得 37kD 的融合蛋白,约占茵体总蛋白量的 30%。经 Ni2+-NTA 树脂亲和层析柱纯化获得纯度大约 90% 的重组蛋白。
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weixin_38643141
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