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参照近源物种线粒体基因组序列设计引物15对,用PCR产物直接测序法测得建昌鸭(Anasplatyrhychos)线粒体基因组全序列,初步分析其特点和各基因的定位。结果显示:建昌鸭线粒体基因组全长16606bp,碱基A、T、G、C的含量分别为29.21%、22.19%、15.77%、32.83%,包含13个蛋白质编码基因、2个rRNA基因、22个tRNA基因和1个非编码调控区(D-loop),基因组结构和已知雁形目鸟类的完全相同。基于线粒体13个蛋白质编码基因序列,采用邻接法构建雁形目8个物种的系统进化树,
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第 32 卷第 2 期 西 南 大 学 学 报 (自然科学版) 2010 年 2 月
Vol畅32 No畅2 Journal of Southw est University (Natural Science Edition) Feb畅 2010
文章编号 :1673 9868(2010)02 0038 06
建 昌 鸭 线 粒 体 基 因 组 全 序 列 分 析
①
涂剑锋
1 ,2
, 黄银花
1
, 刘三凤
3
, 李 宁
1
1畅 中国农业大学 农业生物技术国家重点实验室 ,北京 100094 ;2畅 中国农业科学院 特产研究所 ,吉林 吉林 132109 ;
3畅 江西农业大学 动物科技学院 ,南昌 330045
摘要 :参照近源物种线粒体基因组序列设计引物 15 对 ,用 PCR 产物直接测序法测得建昌鸭(A nas
p
lat
y
rhychos )
线粒体基因组全序列 ,初步分析其特点和各基因的定位 .结果显示 :建昌鸭线粒体基因组全长 16 606 bp ,碱基 A 、
T 、 G 、C 的含量分别为 29畅21% 、22畅19% 、15畅77% 、32畅83% ,包含 13 个蛋白质编码基因 、2 个 rRNA 基因 、22 个
tRNA 基因和 1 个非编码调控区(D‐loop) ,基因组结构和已知雁形目鸟类的完全相同 .基于线粒体 13 个蛋白质编
码基因序列 ,采用邻接法构建雁形目 8 个物种的系统进化树 ,所得结果与传统的系统分类基本一致 .
关 键 词 : 建昌鸭 ;线粒体基因组 ;序列分析
中图分类号 : S813畅1 文献标识码 : A
我国是世界上鸭品种资源最丰富的国家 ,仅地方品种就有 27 个之多 ,其中建昌鸭等 8 个品种已被列入
国家重点保护品种 .建昌鸭在分类学上隶属鸟纲雁形目(Anseriform )鸭科(Anatidae)河鸭属 ,主要产于四
川凉山州安宁流域的西昌 、德昌等地 .建昌鸭有生长快 、成熟早 、 体格大 、产肉多 、皮脂少 、 肥肝大 、 杂交
优势强等特点 ,已成为我国鸭类养殖业的重要组成部分 .
目前 ,对建昌鸭遗传结构研究的资料不多 ,主要有核型及染色体带型分析
[1]
、蛋白电泳分析
[2]
、微卫
星多态分析
[3 4]
以及线粒体 DNA (mtDNA )限制性酶切图谱分析
[5]
等 ,很少有以 mtDNA 作为遗传标记进
行研究的报道 .动物 mtDNA 具有分子结构简单 、母性方式遗传 、进化速度快等特点 ,是从分子水平研究物
种遗传结构和起源进化的重要遗传标记
[6 8]
.基于以上原因 ,我们测定了建昌鸭 mtDNA 全序列 ,并基于线
粒体蛋白质编码基因构建了雁形目 8 个物种的系统进化树 ,以期为建昌鸭的起源进化研究及种质资源保护
和合理利用提供资料 .
1 材料与方法
1畅 1 材 料
建昌鸭血样由中国农业科学院家禽所提供 ,随机抽取 1 份为实验材料 .其它物种线粒体基因组全序列
皆来自 GenBank ,序列登录号见表 1 .
1畅 2 总 DNA 的提取
酚氯仿(北京鼎国)抽提法 ,0畅7% 琼脂糖凝胶电泳检测 .
1畅 3 引物设计和 PCR 扩增
根据红头潜鸭 mtDNA 序列
[9]
设计引物 15 对(表 2) ,由上海生工合成 .PCR 扩增反应总体积为 25
μ
L :模
①
收稿日期 : 2009 01 10
基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 (30221005) ;国家重点基础研究发展计划(2006CB200100) .
作者简介 : 涂剑锋 (1980 ) ,男 ,江西靖安人 ,硕士 ,助理研究员 ,主要从事动物遗传育种研究 .
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