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用PCR、酶切、连接方法将地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因(amy)表达单元(包括启动子、信号肽及淀粉酶基因)克隆到pHY300PLK中,并用反向PCR、同源重组方法,去除重组质粒的氨苄抗性基因,以利用α-淀粉酶基因的启动子和信号肽高效表达自身蛋白及外源蛋白。结果表明:连入了α-淀粉酶表达单元的 pHY300PLK,即pAMY质粒能够分泌表达α-淀粉酶,且去除了氨苄抗性基因的pAMY质粒,即pAMY1质粒能更有效的表达α-淀粉酶;将纤维素酶基因连接到pAMY1质粒中淀粉酶信号肽的下游,得到的重组质粒pCE
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