论文研究 - 长期有效的技术

来自组织和器官的分离细胞的体外培养有时用于保存和繁殖木本植物的独特基因型。 然而，该技术需要定期传代培养，这增加了存储成本，并产生了污染和体细胞克隆变异积累的风险。 我们检查了培养基中糖成分，光周期长度，光强度和环境温度对植物材料体外存活的影响。 这项研究是针对49个基因型的杨（Populus tremula）（46个带有GFP，Xeg和Gus基因的转基因基因型和3个对照（野生型）基因型）进行的。 结果表明，通过优化所研究的所有存储参数的综合效果，可以实现植物的有效存储。 根据实验数据，我们开发了一种协议，可在不进行传代培养的情况下长期保存理想基因型，存活率高达98％。 将植物材料在含有15 g / L蔗糖，7.5 g / L山梨糖醇和7.5 g / L甘露糖醇的WPM培养基上预培养，然后在+ 4°C于24小时光照下保存时，可获得最佳结果日循环，每天只有8个小时的光照，最大光照强度为2000勒克斯。 通过在含有1 mg / L赤霉素的培养基上进行培养来进行存储后恢复。 所开发的方法可用于在不进行传代培养的情况下将研究的基因型有效地体外保存长达24个月。