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ELISA实验酶标仪洗板机的原理和使用PPT课件.pptx
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酶
标
(
E
L
I
S
A
)
•
E
L
I
S
A
是
酶
联
接
免
疫
吸
附
剂
测
定
(
E
n
z
y
m
e
-
L
i
n
k
e
d
I
m
m
u
n
o
s
o
r
b
n
e
n
t
A
s
s
a
y
)
的
简
称
。
•
以
免
疫
学
反
应
为
基
础
,
将
抗
原
、
抗
体
的
特
异
性
反
应
与
酶
对
底
物
的
高
效
催
化
作
用
相
结
合
起
来
的
一
种
敏
感
性
很
高
的
试
验
技
术
•
自
上
世
纪
7
0
年
代
初
问
世
以
来
,
发
展
十
分
迅
速
,
目
前
已
被
广
泛
用
于
生
物
学
和
医
学
科
学
的
许
多
领
域
。
第
1
页
/
共
39
页
1.
ELISA
的原理
2.
ELISA
的类型
3.
试剂准备:
免疫吸附剂
结合物
酶底物的准备
4.
对照设定
5.
标本的采取和
保存
6.
结果判断
第
2
页
/
共
39
页
ELISA
是一种免疫测定。
基础
:
抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入
酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量
与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分
析。
1.
ELISA
的原理
第
3
页
/
共
39
页
E
L
I
S
A
技
术
原
理
•
1
.
抗
原
或
抗
体
的
固
相
化
及
抗
原
或
抗
体
的
酶
标
记
。
•
2
.
结
合
在
固
相
载
体
表
面
的
抗
原
或
抗
体
仍
保
持
其
免
疫
学
活
性
。
•
3
.
酶
标
记
的
抗
原
或
抗
体
既
保
留
其
免
疫
学
活
性
,
又
保
留
酶
的
活
性
。
•
4
.
受
检
标
本
与
固
相
载
体
表
面
的
抗
原
或
抗
体
起
反
应
。
再
加
入
酶
标
记
的
抗
原
或
抗
体
,
也
通
过
反
应
而
结
合
在
固
相
载
体
上
。
•
5
.
此
时
固
相
上
的
酶
量
与
标
本
中
受
检
物
质
的
量
呈
一
定
的
比
例
。
•
6
.
加
入
酶
反
应
的
底
物
后
,
底
物
被
酶
催
化
成
为
有
色
产
物
,
产
物
的
量
与
标
本
中
受
检
物
质
的
量
直
接
相
关
,
故
可
根
据
呈
色
的
深
浅
进
行
定
性
或
定
量
分
析
。
测
定
方
法
具
有
很
高
的
敏
感
度
(
p
g
-
n
g
/
m
l
水
平
)
,
并
且
重
复
性
好
。
第
4
页
/
共
39
页
1.1
抗原抗体反应
1.1.1
可逆性
抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态
平衡,其反应式为:
Ag+Ab→Ag
·
Ab
抗体的亲和力(
af
finit
y
)
,可以用
平衡常数
K
表
示:
K=
[Ag
·
Ab]
/
[Ag][A
b] ,A
g
·
Ab
的解离程度与
K
值有关。
高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空
间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。
解离后的
抗原或抗体均能保持原有的结构和活性。
第
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