【知识点】
1. 基因工程：基因工程是一种人工操纵生物遗传物质的技术，通过将外源基因插入宿主细胞的基因组中，使宿主细胞表达出目标基因的产物。在本题中，涉及到了基因的“针线”，即DNA连接酶，它是基因工程中用来连接DNA片段的关键酶。
2. DNA连接酶：DNA连接酶是基因工程中的一种重要工具酶，它能够将限制性核酸内切酶切割产生的黏性末端或平末端的DNA片段连接起来，形成磷酸二酯键，从而实现DNA片段的重组。
3. PCR技术：聚合酶链式反应（PCR）是一种体外快速复制DNA的技术，它模拟了细胞内的DNA复制过程。PCR过程包括变性、复性和延伸三个步骤。变性过程中双链DNA被加热解旋，复性时两条单链DNA重新配对，延伸则是在耐高温DNA聚合酶的作用下，利用dNTPs（脱氧核糖核苷三磷酸）合成新的DNA链。
4. 运载体：运载体是基因工程中用于携带目的基因进入宿主细胞的分子，如质粒、噬菌体或病毒等。理想的运载体应具备多个限制酶切点，便于插入目的基因，有标记基因以辅助检测和筛选，能在宿主细胞中稳定存在并大量复制。
5. 蛋白质工程：蛋白质工程是通过改变基因来改变蛋白质的氨基酸序列，以期获得具有期望功能的新型蛋白质。它涉及到对蛋白质结构和功能的预测，以及对氨基酸序列的设计。
6. 受体细胞：在基因工程中，常见的受体细胞如细菌（如大肠杆菌）和酵母菌，因其结构简单、遗传物质少、繁殖速度快，便于实验操作和基因表达。
7. 基因治疗：基因治疗是针对遗传病的一种策略，通过替换、修复或抑制有缺陷的基因来治疗疾病。它可以分为体内和体外基因治疗，但并非所有遗传病都能通过基因治疗治愈，且操作复杂，效果和安全性需要严格评估。
8. 限制性核酸内切酶：这种酶能够识别特定的核苷酸序列，并在特定位置切割DNA，产生黏性末端或平末端。
9. 基因工程应用：基因工程在农业中的应用主要体现在培育抗逆、高产、优质作物上，而在医疗领域，如基因治疗，虽然取得了一些进展，但仍处于研究阶段，尚未广泛应用。
10. 蛋白质工程与基因工程的区别：提高赖氨酸含量的技术，如果直接改变基因序列，属于基因工程；而调整酶的活性通常涉及蛋白质的结构改造，属于蛋白质工程。
11. DNA片段的限制酶切割：通过比较DNA片段大小，可以看出只有②和④的切割结果具有部分重叠，这可能是由同一种限制酶切割形成的。
12. 限制性核酸内切酶：酶a和b切割DNA产生的片段长度可以推断它们的识别序列，酶a能识别的序列不止一个，酶b切割后得到的片段可以形成多种组合，但不同酶切割的末端可能无法匹配，不能连接。
13. 人胰岛素基因表达载体：胰岛素基因通常通过反转录从mRNA获得，但这个过程并不一定发生在胰岛A细胞中；标记基因用于筛选含有载体的细胞，但不保证细胞一定含有目的基因；起始密码子启动翻译，而终止密码子结束翻译，而不是转录。
14. 1986年的人类基因组计划启动：这个事件标志着基因组学领域的重大突破，开启了大规模的基因组测序时代，对后续的基因工程、基因组研究、疾病诊断和治疗产生了深远影响。
