微生物计数USP61中文版借鉴.pdf

【微生物计数USP61】是美国药典中关于微生物限度检测的标准，主要用于评估药品、原料和成品中好氧微生物的数量。这个标准确保在制药过程中控制微生物污染，以保证产品的安全性和质量。 1. **检测目的**： USP<61>旨在检测和限制可能存在于药品和原料中的好氧微生物，包括细菌总数，以防止潜在的健康风险。 2. **自动化方法**： 允许使用验证过的自动化检测方法，只要它们能提供与传统方法相同或更好的检测结果。 3. **无菌操作**： 在整个实验过程中，必须遵循严格的无菌操作规程，以防止外来微生物的污染。 4. **培养条件**： 标准培养条件是30-35℃的恒温培养箱，培养时间通常为24至48小时。"生长"的定义是指证明存在活动的微生物。 5. **准备实验**： 实验前，需验证样品不会抑制微生物生长。通过接种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和沙门氏菌来测试样品的抑制作用。 6. **中和剂**： 如果样品抑制微生物生长，可添加中和剂如大豆卵磷脂或聚山梨醇酯20，以解除其抑菌效果，并重新进行实验。 7. **薄膜过滤法**： 对于含有抑菌物质的可溶性产品，适合使用薄膜过滤法进行微生物检测。若中和和稀释方法无效，可能需要进一步的光谱分析来识别产品的杀菌成分。 8. **培养基的制备**： 使用纯化水配制培养基，调整pH值至7.2±0.1，然后进行高压灭菌。不同类型的培养基如液体酪蛋白消化物-大豆卵磷脂-聚山梨醇酯20培养基和大豆酪蛋白消化物琼脂培养基有特定的配方和制备步骤。 9. **pH调整**： pH值的调整应在25±2℃的条件下进行，以确保培养基的稳定性和微生物的正常生长。 10. **灭菌**： 培养基通常使用高压灭菌器进行灭菌，灭菌时间和体积有关，以确保彻底杀死可能存在的微生物。 USP<61>提供了标准化的微生物计数方法，通过严谨的实验步骤和质量控制，确保药品在生产过程中的微生物安全性。这一标准不仅适用于制药行业，也为其他相关领域提供了一套可靠的微生物检测框架。