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专题 1 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术,
赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程
是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术。
操作水平 :分子 原理:基因重组
〔一〕基因工程的根本工具
1.“分子手术刀〞——限制性核酸内切酶〔限制酶〕
〔1〕来源:主要是从原核生物中别离纯化出来的。
〔2〕功能:能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位
的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
〔3〕结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针〞——DNA 连接酶
(1)两种 DNA 连接酶〔E·coliDNA 连接酶和 T
4-
DNA 连接酶〕的比拟:
①相同点:都缝合磷酸二酯键。
②区别:E·coliDNA 连接酶来源于 T
4
噬菌体,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的
磷酸二酯键连接起来;而 T
4
DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效
率较低。
(2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,
形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车〞——载体
〔1〕载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点,供外源 DNA 片段插入。
③具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。
〔2〕最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具
有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。
〔3〕其它载体: 噬菌体的衍生物、动植物病毒
(二)基因工程的根本操作程序
一基因的结构:
基因是有遗传效应的 DNA 片段(注:RNA 病毒为 RNA),分为编码区和非编码区。
编码区:能转录出 mRNA,原核生物中也就是能编码蛋白质的区段
非编码区:不能转录出 mRNA,也不能编码蛋白质的区段
〔1〕原核细胞基因的结构
编码区
编码区
非编码区
非编码区
非编码区
非编码区
编码区上游
编码区上游
编码区下游
编码区下游