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基因工程中的酶ppt课件.ppt
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第三
节
基因工程中的
酶
学
关
关
键
键
词
词
:
:
•
了解各种
酶
在基因工程
中的作用
•
掌握限制性内切
酶
和
连
接
酶
的基本特性
•
逆
转
录
酶
在基因工程中
参与了哪些反
应
?
1
.
2
.
重
组
DNA
技
术
中常用的工具
酶
工具
酶
功能
限制性核酸内切
酶
DNA
连
接
酶
DNA
聚合
酶
I
反
转录酶
多聚核苷酸激
酶
末端
转
移
酶
碱性磷酸
酶
识别
特异序列,切割
DNA
催化
DNA
中相
邻
的
5‘
磷酸基和
3’
羟
基末端之
间
形成
磷酸二
酯键
,是
DNA
切口封合或是
DNA
片段
连
接
①
合成双
链
cDNA
的第二条
链
②
缺口平移制作高比活探
针
③DNA
序列分析
④
填
补
3’
末端
①
合成
cDNA
②
代替
DNA
聚合
酶
I
进
行填
补
,
标记
或
DNA
序列分析
催化多聚核苷酸
5’
羟
基末端磷酸化,或
标记
探
针
在
3’
羟
基末端
进
行同
质
多聚物加尾
切除末端磷酸基
3
.
第一
限制性核酸内切
酶
这
类
酶
又
简
称
为
限制性内切
酶
或限制
酶
。
是一
类
能
够
识
别
双
链
DNA
分子中的某种
特定核苷酸序列,并由此切割
DNA
双
链
结
构的核苷酸内切
酶
。
4
.
一、限制性内切
酶
概念的提出
寄主控制的限制(
restriction
)与修
饰
(modification)
现
象:
人
们
发
现
侵染大
肠
杆菌的噬菌体都存
在着一些功能性障碍。即所
谓
的寄主
控制的
限制与修
饰
现
象
简
称(
R/M
体系)。
细
菌的
R/M
体系
类
似于免疫系
统
,能
辨
别
自身的
DNA
与外来的
DNA
,并能使后
者降解掉。
5
.
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