【动物细胞工程】是生物学中的一个重要分支,尤其在高中生物教育中占有显著地位。这个领域主要涉及动物细胞的培养、融合以及由此产生的技术应用,如单克隆抗体的制备。单克隆抗体是一种高度特异性的免疫球蛋白,由于其能够识别并结合单一抗原表位,因此在医学诊断和治疗中有广泛的应用。
1. **单克隆抗体制备过程**:需要通过免疫小鼠来获得能够产生特定抗体的B淋巴细胞。这些细胞在抗原刺激下增殖并分化为浆细胞,能够分泌抗体。然后,将这些B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,骨髓瘤细胞是一种能够在体外无限增殖的细胞,但在特定培养基HAT(含次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶)上无法生存。融合后的细胞,如果是由B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成,能够在HAT培养基上存活并保持产生特定抗体的能力。通过筛选,可以选择出这种融合细胞,即杂交瘤细胞。
2. **单克隆抗体的应用**:研究者利用单克隆抗体作为抗癌药物的载体,因为它们能够特异性地与癌细胞结合。这种结合使得抗癌药物能够精确地送达目标细胞,提高治疗效果,减少对健康细胞的损害。这种方法被称为“靶向治疗”。
3. **细胞融合方法**:诱导细胞融合有多种方式,包括使用聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电刺激或离心等。在动物细胞中,通常使用PEG或灭活的病毒来促进细胞间的融合。
4. **动物细胞培养技术**:在实验中,B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合前,需要先用适当的酶如胰蛋白酶处理,而非纤维素酶,以使细胞分离。纤维素酶主要用于植物细胞壁的分解。
5. **单克隆抗体的产生**:杂交瘤细胞能够在体内外持续增殖,并产生大量一致的抗体,这就是单克隆抗体。
6. **产生单克隆抗体的细胞**:杂交瘤细胞是唯一能够产生单克隆抗体的细胞,由B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成。
7. **细胞选择性**:选择胚胎或幼龄动物的组织细胞进行培养,是因为这些细胞的分裂增殖能力较强,适合体外培养。
8. **动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别**:两者虽然都涉及细胞融合,但诱导方法和技术手段不同。动物细胞常使用物理或化学方法,植物细胞则可能涉及酶解细胞壁。
9. **融合的决定因素**:动物细胞融合主要依赖于细胞膜的流动性。
10. **核移植与遗传**:母羊甲的细胞核移植到母羊乙的去核卵细胞中,形成的胚胎遗传信息主要来自甲,因此出生的小羊大多数性状会像甲。
11. **“生物导弹”**:指的是在单克隆抗体上连接抗癌药物,这种复合物可以精确导向并杀死癌细胞。
12. **动物细胞工程技术基础**:动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础,其他技术如单克隆抗体的制备都建立在这个基础上。
13. **克隆定义**:克隆通常指无性繁殖后代的过程,C选项中鼠骨髓瘤细胞与免疫脾细胞的融合形成杂交瘤细胞,能够产生单一抗体的细胞系,符合克隆的概念。
14. **筛选杂交瘤细胞**:在特定培养基上,无法存活的是未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞以及B淋巴细胞的自身融合细胞,但杂交瘤细胞可以存活并增殖。
15. **单克隆抗体的特性**:单克隆抗体可以用于疾病的诊断(诊断盒)、定向治疗,也可通过基因工程进行生产,既能在生物体内生产,也能在体外培养。
16. **单克隆抗体的制备与应用**:正确的是B和D选项,融合后的杂交瘤细胞具有无限增殖和产生单克隆抗体的能力,而单克隆抗体相较于常规抗体,特异性和灵敏度更高。
17. **相关细胞类型**:单克隆抗体的制备涉及效应B细胞、骨髓瘤细胞以及它们融合形成的杂交瘤细胞。
单克隆抗体的制备是一个复杂而精细的过程,它涉及细胞生物学、免疫学和生物技术等多个领域的知识。这一技术不仅对于科研有重要意义,也在医疗领域产生了深远的影响。