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DNA测序仪原理及应用
DNA测序仪原理及应用
DNA、测序
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DNA测序仪原理及应用，DNA基因重组测序
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DNA
测序仪的原理及应用
上海交通大学分析测试中心
侯敬丽
内容
•D
N
A
测序原理
•
CEQ8000 DNA
测序仪
•
基因测序系统的应用
–
基因组
DNA:
染
色体
–
质粒
DNA:
细菌
细胞
–
线粒体
DNA:
胞浆
–
人工染色体
DNA:
BAC YAC
–c
D
N
A
引
双脱氧链末端终止法
1977
年，
Sanger
等人发展建立起来的一种
DNA
测序方法。
基本原理：
双脱氧链末端终止法通过使用链终止剂
—
类似
于正常
dNTP
的
2’,3’-
双脱氧核苷三磷酸
(ddNTP)
，将
延伸的
DNA
链特异性地终止。其反应体系也包括单
链模板、引物、
4
种
dNTP
和
DNA
聚合酶。共分四
组，每组按一定比例加入一种
(ddNTP)
，它能随机
渗入合成的
DNA
链，一旦渗入合成即终止，于是各
种不同大小片段的末端核苷酸必定为该种核苷酸，
可以从放射自显影带上直接阅读
DNA
的核苷酸序列。
双脱氧链末端终止法测序基本原理示意
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