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牡蛎体内及其养殖水体中细菌耐药性研究.docx
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牡蛎体内及其养殖水体中细菌耐药性研究.docx
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牡蛎, 俗称海蛎子、蚝等, 是我国著名的四大养殖经济贝类之一。牡蛎属滤食性动物, 通过不断过滤
海水来获取其中的微生物作为食物。在滤食过程中, 随着时间的变化可积聚环境水体中的细菌, 其中包括
致病菌
[1]
。香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)是我国南方重要海水养殖贝类, 主要分布于浙江、江
苏、福建、广东和广西等沿海低潮区
[2-3]
。正常养殖情况下, 其产量高、经济效益良好。然而, 自 1992 年
以来频发的大规模死亡事件严重影响了牡蛎养殖业的发展, 造成了巨大的经济损失
[4]
。细菌性疾病在贝类
养殖病害事件中常扮演重要角色, 尤其在高温季节, 牡蛎大批量异常死亡现象时有发生, 其中以条件致病
性著称的弧菌(Vibrio)出现频率最高。在海洋环境中, 弧菌几乎无处不在, 包括海水、底泥等, 甚至健康牡
蛎的体内都可能存在弧菌。在养殖过程中, 当牡蛎抵抗力低下且环境中致病性弧菌达到一定阈值时, 即可
能导致疾病的发生, 从而引起大量死亡。尤其是刚固着的稚贝更易受到感染, 病原菌往往借助水流及牡蛎
自身的滤食性, 在贝体内积累, 当条件适合时, 即可能侵袭贝体韧带、外套膜和鳃, 最后全身感染而死
[5]
。
至今, 与细菌性疾病直接相关的防治手段仍以抗生素为主, 抗生素已被广泛应用于控制人类、畜禽和水生
动物的细菌性疾病。由于水环境的复杂性和流动性, 抗生素在水产养殖中的应用很可能对环境产生更为严
重的不良影响。甚至在盲目使用抗生素后, 取得的效果常常与养殖户的预期相悖。在抗生素的选择压力下,
耐药菌保留下来并大量繁殖
[6-7]
。已有报道对杂色鲍 Haliotis diversicolor 体内及其养殖水体中异养细菌耐
药性进行研究, 发现大多数菌株对四环素、青霉素 G、卡那霉素、丁胺卡那霉素等产生了抗药性
[8]
。叶茂
华等
[9]
对贝类中弧菌耐药性研究发现, 受试的 28 株菌中有 25 株对氨苄西林耐药, 1 株对四环素耐药; 邓欢
等
[10]
对从太平洋牡蛎发病幼体中分离的三种弧菌进行耐药性鉴定, 显示 3 株菌均对氯霉素、红霉素敏感,
对呋喃唑酮、青霉素耐药; 张占会等
[11]
对 4 株香港牡蛎致病菌进行药敏测定, 结果显示菌株均对青霉素类
药品具有抗性。而笔者在以往对鲍体内弧菌的耐药性研究中发现, 弧菌对多种药物的耐药率与环境因子显
著相关并呈现一定的季节规律性
[12]
。目前国内关于贝类养殖水体及贝体内细菌的耐药性研究极少, 而牡蛎
作为重要的滤食性贝类, 与养殖环境关系密切, 且牡蛎属于河口养殖种类, 更接近人类居住环境及陆地养
殖系统, 因此, 对牡蛎养殖环境及其体内细菌的耐药性进行了解和分析具有重要的意义。
本研究对采自阳江的香港牡蛎养殖水体和牡蛎体内的 637 株异养细菌进行了药物敏感性测试, 并对
健康牡蛎和发病牡蛎体内细菌的耐药率进行了比较, 深入了解牡蛎体内外环境异养菌的耐药状况, 以期为
贝类细菌性疾病预警防控及河口环境评价提供参考依据。
1 材料与方法 1.1 样品来源
2018 年 1 月—12 月份定期至阳江的牡蛎主养区(东经: 111°73′, 北纬: 21°79′), 随机分离获得 637
个菌株, 其中牡蛎养殖水体细菌 287 株(2216E 培养基, 划线法), 健康牡蛎和病牡蛎体内细菌共 350 株(营
养琼脂培养基, 划线法)。健康牡蛎和病牡蛎体内菌株来源如下:在疾病暴发阶段, 从正常养殖区(未发现异
常死亡现象)和疫区(出现大量异常死亡现象)进行采样。优选正常养殖区采集健康牡蛎, 从邻近海域疫区采
集病牡蛎。初步判别方法:敲击牡蛎贝壳, 健康牡蛎会迅速闭上贝壳; 反之, 如反应迟钝、闭壳肌无力则为
活力差的病牡蛎, 且在进一步的解剖过程中可见病牡蛎贝体较消瘦, 闭壳肌无力, 部分出现颜色异常情
况。
具体采样情况如表 1 所示。
表 1 2018 年不同月份采集分离出的牡蛎体内菌及水体菌优势菌株数(株)Tab. 1 Amount of the dominant
strains from oysters and the farming water samples in each month of 2018
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