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水蛭素(Hirudin,HV)是目前已知的最强有力的凝血酶天然抑制剂,对多种血栓性疾病有很好的预防和治疗作用.构建两种融合DsbA信号肽的分泌型水蛭素Ⅱ基因工程菌,一种分泌的是N端第一个氨基酸突变为Ala的突变型水蛭素Ⅱ(spHV2mut),而另一种分泌的是天然型水蛭素Ⅱ(spHV2).采用重叠延伸(SOE)技术对水蛭素ⅡN端第一个氨基酸的基因序列进行定点突变,分别将突变和未突变的水蛭素Ⅱ基因重组至DsbA信号肽的编码基因下游,经限制性内切酶Nde Ⅰ和BamH Ⅰ酶切后,重组于表达载体pET-39b(+
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