mRNA差异显示技术（DDRT-PCR）是一种用于研究基因表达差异的方法，由Liang和Pardee于1992年首次提出。该技术的核心是利用mRNA逆转录和PCR技术相结合，通过检测不同细胞或组织中表达的基因来探究其功能。mRNA差异显示技术的主要步骤包括总RNA的提取、逆转录成cDNA、使用特定引物进行PCR扩增、利用电泳分离PCR产物以及放射自显影技术检测差异表达的基因。
此技术的原理基于一个基本的生物学现象：不同细胞或同一细胞在不同状态下，所表达的基因并不完全相同。这些基因表达的差异导致了细胞分化、发育、生理和病理过程的多样性。在人类基因组中，大约有30,000至35,000个基因，但并非所有基因都表达，且表达模式各异。mRNA差异显示技术就是用来识别和比较这些差异表达的基因。
mRNA差异显示技术的实施方法利用了真核细胞mRNA的共同特性，即mRNA的3’末端含有poly（A）尾巴。研究者设计了特殊的锚定引物oligo(dT)12MN，其中M代表三个碱基中的任何一个，用来增强引物的Tm值，而N则代表四个碱基中的任意一个，用于对逆转录进行分类。这样，使用12种不同的3’端锚定引物可以产生12种不同的cDNA类型。通过与10个碱基的随机引物结合，可以进行PCR扩增，从而得到一系列大小不同的产物。利用放射性同位素标记的dNTP，在电泳分离后通过放射自显影技术能够检测到不同类型的细胞间的差异表达。
mRNA差异显示技术的优势在于其快速和高效性，能够帮助科学家快速鉴定与特定生理或病理状态相关的基因。然而，该技术也存在一些缺点，如假阳性率较高、对低丰度mRNA的检测能力有限、以及对PCR扩增条件要求比较严格。为克服这些缺点，后续出现了多种改进方法，比如优化引物设计、提高PCR特异性、结合其他分子生物学技术等，使得mRNA差异显示技术更加准确和适用。
mRNA差异显示技术自创立以来，其应用领域不断扩大，不仅广泛用于研究癌症、心脏病、糖尿病等疾病相关的基因表达，也在植物研究中得到了应用。尽管植物基因表达的研究起步较晚，但已经在植物发育、抗病抗逆、遗传育种等领域取得了一系列突破。
mRNA差异显示技术的研究进展显示，这一方法在揭示基因表达的调控机制以及鉴定疾病相关基因方面具有重要意义。随着该技术的不断完善和新的分子生物学技术的结合，mRNA差异显示技术将继续在生命科学领域发挥重要作用，对于推动生物医学研究、药物开发和生物技术的发展具有极大的潜力和价值。
