一步重组法构建产龙胆苦苷酵母重组菌的研究 (2014年)

利用低能N+注入介导秦艽基因组DNA转化多形汉逊酵母技术，结合颜色反应、薄层层析和高效液相色谱等方法筛选重组菌株，获得1株遗传稳定的能生物合成龙胆苦苷的重组酵母菌，被命名为DL-49.经液体培养90 h后，利用HPLC分析其发酵液中的龙胆苦苷，其产量为2.22 mg/L.将重组菌株传代培养8代后，分析显示重组酵母菌生物合成龙胆苦苷的产量基本稳定．试验表明，采用低能离子注入介导秦艽基因组转化酵母技术，可以在龙胆苦苷生物合成相关基因信息未知的情况下，直接获得能生物合成龙胆苦苷的酵母重组菌．