正常脐血TCR va 亚家族的分布和克隆性表达 (2007年)

目的:了解正常脐血中T细胞受体(TCR ) Va亚家族T细胞的分布和克隆性情况。方法:利用RT-PCR分别扩增10例正常脐血单个核细胞的TCR Va 29个亚家族基因,了解各Va亚家族的利用情况。阳性的 PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度,了解T细胞的克隆性。9例健康成人外周血和 T细胞株Jurkat作为对照。结果:正常脐血T细胞平均表达17.30±5.48个Va亚家族,占全部家族的59.65%± 18.89%,以Va3,4,5,6,8,10,12,13,15,17,21和Va2 ### 正常脐血TCR Va 亚家族的分布和克隆性表达 #### 概述 本研究旨在探讨正常脐带血中T细胞受体（TCR）Va亚家族T细胞的分布及其克隆性状况。研究通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对脐带血样本中的TCR Va 29个亚家族基因进行扩增，并通过荧光标记及基因扫描技术来评估T细胞克隆性。同时，研究还将脐带血样本与健康成人外周血样本以及T细胞株Jurkat进行对比。 #### 方法 - **样本收集**：研究选取了10例正常脐带血样本、9例健康成人外周血样本以及T细胞株Jurkat作为对照组。 - **RT-PCR扩增**：采用RT-PCR技术分别扩增上述样本中的TCR Va 29个亚家族基因，以了解这些亚家族基因在不同样本中的表达情况。 - **克隆性分析**：通过荧光素标记和基因扫描技术分析PCR阳性产物的CDR3区域长度，以此来判断T细胞的克隆性状态。 - **统计分析**：对扩增结果进行统计处理，比较不同样本间TCR Va亚家族的表达差异。 #### 结果 - **脐带血样本**：正常脐带血样本中，T细胞平均表达了17.30 ± 5.48个Va亚家族基因，占所有Va亚家族的59.65% ± 18.89%。其中，Va3、Va4、Va5、Va6、Va8、Va10、Va12、Va13、Va15、Va17、Va21 和 Va25的表达最为显著。 - **健康成人外周血样本**：与脐带血样本相比，健康成人外周血样本中大多数Va亚家族均有表达。特别地，Va1、Va6 和 Va13在脐带血样本中的表达率高于健康成人对照组；而Va14 和 Va16的表达率则低于对照组。 - **T细胞株Jurkat**：T细胞株Jurkat仅表达Va1亚家族。 - **克隆性分析**：基因扫描结果显示，10例脐带血样本中有2例在Va24和Va28 T细胞中出现寡克隆性表达，其余样本均为多克隆性表达。 #### 讨论 - **脐带血T细胞分布特点**：研究发现脐带血中的TCR Va亚家族T细胞分布存在一定的倾斜性，即某些特定亚家族的表达更为常见。这可能反映了新生儿免疫系统的发育特性。 - **克隆性差异**：虽然绝大多数TCR Va亚家族T细胞呈现多克隆性，但个别情况下也出现了寡克隆性现象。这一发现提示，在某些特定条件下，脐带血中可能存在选择性克隆扩增的现象。 - **与健康成人外周血的比较**：脐带血与健康成人外周血在TCR Va亚家族的表达模式上存在明显差异，这可能反映了年龄和环境因素对T细胞免疫应答的影响。 #### 结论 本研究表明，正常脐带血中的TCR Va亚家族T细胞分布具有特定的倾斜性，并且绝大部分TCR Va亚家族T细胞呈多克隆性表达。此外，研究还揭示了脐带血与健康成人外周血之间在TCR Va亚家族表达上的差异，为进一步探究T细胞发育及功能提供了重要参考。