梨ISSR-PCR反应体系的正交优化研究① (2014年)

以‘饼子梨’为试材，利用正交设计L16（45）研究了反应体系中引物、模板DNA浓度等5个因素4个水平对梨反应体系的影响，PCR结果应用极差分析和MINITAB软件对扩增结果进行方差分析。梨最佳ISSR-PCR反应体系：25 μL反应体系中含2.5 μL 10 × Buffer, 2.0 mmol/L Mg2+，0.25 mmol/L dNTPs, 0.25 μmol/L引物，60 ng模板DNA, 0.75 U Taq DNA聚合酶。优化的ISSR-PCR反应体系稳定性高和重复性较好，为梨品种指纹图谱构建