收稿日期!
2008鄄 09鄄 23
" 修回日期!
2009鄄 01鄄 10
基金项目! 非盈利性科研院所基金资助项目#
RISF060702
$
作者简介! 陈国良% 从事林木抗逆基因工程研究&
E鄄 mail
!
glc_2008@163.com
& 通信作者! 卓仁英% 副研究员% 博
士% 从事林木抗逆功能基因组学等研究&
E鄄 mail
!
zhuory@gmail.com
浙江林学院学报
２００9
!
26
"
5
#$
644 - 651
!"#$%&’ "( )*+,-&%. /"$+01$2 3"’’+.+
青杨双向电泳实验体系的建立
陈国良
1
，
2
，
蒋 晶
1
，
乔桂荣
1
，
金 梁
2
，
孙月华
2
，
杨 晔
1
，
周 婧
1
，
卓仁英
1
’
1．
中国林业科学研究院 亚热带林业研究所% 浙江 富阳
311400
"
2.
兰州大学 草地农业科技学院% 甘肃 兰州
730020
(
摘要
：
用改良丙酮沉淀法
%
三 氯 乙 酸
"
TCA
&
鄄
丙酮沉淀法和酚抽法抽提青杨
4"5#’#0 6&1*&2&%&
的蛋白质
!
分别获得
了
437
!
603
和
721
个蛋白斑点
!
以酚抽法提取的分离纯化方法效果最佳
!
不仅能很好地提取蛋白
,
而且能有效去除样品
中的盐分
’
通过比较
!
分析了双向电泳不同条件对电泳结果的影响
!
确立 了
300 μg
(
IPG
胶条
－1
的最 佳上样 量
%
90 000
V
(
h
的聚焦时间以及
20 min
平衡时间的双向电泳条件
)
研究还比较了氯化钠胁迫前后双向电泳图谱差异
!
发现有
46
个
蛋白点存在差异
!
其中
10
个下调
!
36
个上调
*
4
个新诱导表达
#)
图
9
参
24
关键词
：
植物学
+
氯化钠胁迫
+
蛋白质组学
+
双向电泳
+
青杨
中图分类号
：
S718.4
文献标志码
：
A
文章编号
：
1000鄄5692
*
2009
#
05鄄0644鄄08
4"5#’#0 leafy proteomics with NaCl stress using two鄄dimensional
electrophoresis analysis
CHEN Guo鄄liang
1
%
2
%
JIANG Jing
1
%
QIAO Gui鄄rong
1
%
JIN Liang
2
%
SUN Yue鄄hua
2
%
YANG Ye
1
%
ZHOU Jing
1
%
ZHUO Ren鄄ying
1
)
1. Research Institute of Subtropical Forestry
%
The Chinese Academy of Forestry
%
Fuyang 311400
%
Zhejiang
%
China
"
2. College of Pastoral Agriculture Science and Technology
%
Lanzhou University
%
Lanzhou 730020
%
Gansu
%
China
(
Abstract
：
Salt stress i s one of the major abiotic stressed over the world. Most of the researchs were foucsed
on improve the abili ty of plant species living in salt soil. Two鄄 dimesional gel electrophoresis
#
2鄄DE
(
is one of
the most useful methods in proteins research. To determine total protein extraction efficiency from 4"5#’#0
6&1*&2&%& with two鄄 dimensional electrophoresis
#
2鄄DE
(
analysis
%
three protein extraction methods
#
phenol
extraction
%
improved acetone precipitation method
%
and TCA鄄acetone precipitation method
(
were compared.
Electrophoresis conditions and leafy proteomics of 47 6&1*&2&%& with salt stress were also anal yzed. Results
showed that the three protein extraction methods generated 437
%
603
%
and 721 protein spots with the
phenol extraction method more effectively removing sal t from the protein sample
%
generating more protein
spots
%
and giving clearer background for the 2鄄 D E map. The results showed that condition of 300 μg per
IPG gel
%
20 min equilibrium time
%
90 000 V
*
h IEF time was the sui table treatment. Also
%
the leafy
proteomics analysis revealed that 10 protein spots was down鄄regulators
%
32 protein spots was up鄄regulators
%
and 4 new protei n spots was induced by salt stress. These proteins may be important response to salt stress.
+
Ch
%
9 fig. 24 ref.
,
Key words
：
botany
"
NaCl stress
"
proteomics
"
two鄄dimensional electrophor esis
)
2鄄DE
("
8"5#’#0 6&1*&2&%&
杨树
8"5#’#0
是世界上分布最广% 适应性最强的树种% 主要分布于北半球温带和寒带地区% 在中
国亚热带- 暖温带和中 温 带 均 有 分 布
+
1
,
& 杨 树 是 第
3
个 完 成 全 序 列 测 定 的 植 物
+
2
,
& 青杨
8"5#’#0
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