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为了建立蕨菜中总蛋白质的双向电泳技术体系,作者以新鲜蕨菜为实验材料,分别比较了不同蛋白提取方法,不同上样量以及不同pH范围IPG胶条对2-DE图谱的影响。结果表明,采用TCA-丙酮结合酚抽法提取蕨菜中的蛋白质,采用IPG胶条pH5-8、蛋白质的上样量为1 200μg、考马斯亮蓝G-250胶体考染法进行染色。在此条件下进行蕨菜全蛋白质的双向电泳所得到的图谱蛋白质点多达719个。且蛋白质点分布均匀、背景清晰、分辨率较高。
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噩噩罩噩噩
藏菜总蛋白质双向电泳技术体系的建立
黄劲松
1
,
2
姜丽
石古今
宦晨
郁志芳
*1
(1.南京农业大学食品科技学院,江苏南京
210095;2.
Y
也州学院材料与化学
T
程系句安徽池州
247000)
摘要:为了建立蔬菜中总蛋白质的双向电泳技术体系,作者以新鲜蔬菜为实验材料,分别比较了
不同蛋白提取方法,不同上样量以及不同
pH
范围
IPG
胶条对
2-DE
图谱的影响。结果表明,采
用
TCA-
丙嗣结合盼抽法提取蔬菜中的蛋白质,采用
IPG
胶条
pH5-8
、蛋白质的上样量为
1
200
问、考马斯亮蓝
G-250
肢体考染法进行染色。在此条件下进行蔬菜全蛋白质的双向电泳所得到
的图谱蛋白质点多达
719
个,且蛋白质点分布均匀、背景清晰、分辨率较高。
关键词:葳菜;蛋白质纽学;双向电泳
中图分类号
:Q
81
文献标志码
:A
文章编号
:1673--1689(2013)07
一
0762--05
Research on Two-Dimensional Electrophoresis Conditions for Proteomic
Analysis of
Pteridium aquilinum
HUANG
Jin-song'
气
JIANG
Li' ,
SHI
Yun' ,
HUAN
Chen' ,
YU
Zhi
τ
fan
g*'
(1.
College
of
Food
Science &
Technology
,
Nanjing
Agricultural
University
,
Nanjing
210095 , China;
2.
Department
of
Materials
and
Chemical
Engineering ,
Chizhou
college
,
Chizhou
247000 , China)
Abstract:
In
order
to
establish
two-dimensional
electrophoresis technology system of total proteins
of
Pt
eridium α
quilinum
,
2-DE
maps was
compared
with
protein
extraction
method
,loading amount
and
pH
ranges of
IPG
strips
The results showed
that
phenol
extraction protocol
combined
with TCA/
acetone was more favorable for total
protein
extraction from fresh
Pt
eridium
α
q
uilinum. A high
quality
2-
DE
map
with more
protein
spots,
better
dispersion,
clearer
background
and
higher
protein
point resolution were
acquired
by
using
the
following optimized
parameters:
loading
1200μg
protein
sample on
17cm
IPG
strip
with
pH
5-8
,
and
finally
detecting
proteins with Coomassie
brilliant
blue
G250
staining.
Under
above
experimental
conditions ,
the
total
number
of
protein
spots is
719
, this
experimental
results
provides a
basis
for
further
study of post
-harvested
Pt
eridium aquilinum
proteomlcs.
Keywords:
Pt
eridium
αq
uilinum ,proteomics ,
two-dimensional
electrophoresis
(2-
D
E)
收稿日期:
2013 一
04
一
19
基金项目.安徽省教育厅自然科学基金项目
(KJ2013Z237)
。
作者简介:黄劲松(l
979~)
,男,安徽含山人,工学硕士,讲师,主要从事采后生物学研究。
E-mail:
huangjs886@aliyun.com
*通信作者:郁志芳(l
960~)
,男,江苏南通人,工学博士,教授,主要从事果蔬采后生物学与贮藏加工研究。
E-mail:
yuzhi88@yahoo.co
ll1
.cn
ø Journal
of
Food
Science
and
Biotechnology
Vo
l.
32
No.7
2013
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weixin_38549520
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