非热射频刺激抑制藻类中的色氨酸合酶β亚基。

为了证明Nativis信号转导技术（Butters等，2014）调节藻类mRNA和蛋白质表达的能力，我们测试了是否可以改变莱茵衣藻中特定酶的水平。 通过应用源自已发表的siRNA的信号，我们抑制了色氨酸合酶β亚基（MAA7）的合成（Zhao et al。2009）。 使用较低的MAA7，在前药5-氟吲哚（5-FI）的存在下，莱茵衣藻可以生长，因为可以将较少的5-氟吲哚转化为有毒的5-氟-L-色氨酸（5-FT） 。 我们发现有信号的增长比无信号的增长了24％（±5％）。 要查看该效果是否是由于编码MAA7的mRNA数量减少所致，我们使用实时定量PCR（RT-QPCR）来测量MAA7 mRNA的水平。 为了使MAA7 mRNA水平正常化，我们将它们与不受信号影响的mRNA水平进行了比较（G蛋白β亚基样多肽，Cblp）。 有两个条件可以提高信号的有效性。 可以在对数生长期（在750 nm处以0.104 OD的密度开始培养）处理细胞培养物。 或者可以在对数增长的后期处理培养物，但处理时间更长（8.7％对3.5％的培养时间）。 在这些条件下，我们发现MAA7的mRNA水平下降了约50％。 在较早