大菱鲆抗菌肽基因酵母表达载体的构建及表达 (2008年)

将大菱鲆(Scophthalmus maxinus)hepcidin基因成熟肽序列经过部分改造后采用PCR方法克隆到毕赤酵母胞内表达载体pGAPZB中，构建了重组胞内表达载体pGAPZB-tbhep6his。用Bln I线性化重组质粒后，电击转化毕赤酵母SMD1168。经过Zeocin筛选和PCR扩增转化子基因组筛选，得到了数株基因工程酵母菌。通过SDS-PAGE和Western blot 鉴定，发现目的蛋白与预期蛋白的分子量相吻合，并能与特异抗体antihis 特异性结合，表明大菱鲆抗菌肽hepcidi