受强力霉素调控的真核表达系统RAW264.7Tet-lon细胞株的建立 (2011年)

目的:利用Tet-lon诱导表达调控系统构建可以用强力霉素调控表达的RAW264.7Tet-lon 细胞株,探讨目的基因NF-kB的作用。方法:将调控质粒pCDNA6 /TR转染RAW264.7细胞,经潮霉素筛选得到稳定单克拢单克隆扩大培养后,转染pCDNA4 /TO/lacZ质粒,再经过强力霉素诱导表达,检测β-半乳糖苷酶(β-gal)活性,筛选出受强力霉素调控的高诱导水平、低背景表达的RAW264.7Tet-on细胞株。结果:成功建立一株受强力霉素调控的高诱导水平、低背景表达的细胞株RAW264.7T