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我们已经开发了一种新型的双酶化学,称为rhAmp:registered:SNP基因分型,它基于RNase H2依赖性PCR(rhPCR),可为SNP分析提供高信号和特异性。 rhAmp SNP基因分型将独特的两种酶系统与3'末端封闭的DNA-RNA杂交引物结合在一起,以探询SNP位点。 封闭的引物的激活发生在与其完全匹配的靶标杂交后,从而消除或大大减少了引物二聚体。 热稳定的热启动RNase H2立即在核糖的5'处切割引物,释放封闭基团并允许引物延伸。 使用突变的Taq DNA聚合酶可进一步提高PCR特异性,从而改善等位基因的识别能力。 使用通用报告系统获得信号生成,该系统仅需要两个双等位基因SNP的报告探针。 选择了1000个随机选择的SNP以验证设计管线的95%设计率。 测试了130个人类SNP目标的二次采样,实现了98%的呼叫率和99%的呼叫准确性。 rhAmp SNP基因分型分析与各种qPCR仪器兼容,包括QuantStudioTM 7 Flex,CFX384TM,IntelliQube:registered:和Biomark HDTM。 与TaqMan:registered:
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