麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因的克隆与原核表达 (2011年)

通过RACE技术,克隆了麻疯树肌醇-1-磷酸合成酶基因(JcMIPS),其开放读码框为1530bp,编码510个氨基酸。序列分析表明,JCMIPS与多种植物MIPS基因的氨基酸序列具有较高相似性,达87.0800-91.18％,且含有MIPS基因的四个保守域。在此基拙上构建了原核表达载体,在1mmol/LIPTG,18℃下诱导表达5h,获得了可溶性的目的蛋白。亲和层析纯化目的蛋白,通过体外酶学反应鉴定,纯化样品具有酶学活性,表明JCMIPS原核表达成功。