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为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化。通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μLPCR反应体积,10×Buffer 2.5 μL,2.5 mmol/L MgCl2,dNTP 2.5 pxL(各2.5mmol/L),模板DNA为30ng,Taq聚合酶1.5U,随机引物12pmol,ddH2O14.2μL最佳扩增程序:94℃预变性3min,94℃变性50s,
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