采用反转录PCR的方法,从人类肝组织细胞系L02中扩增Gadd45a基因的全长读码框,并将其克隆到pCDNA3 .0上,该重组质粒命名为pC/ Gadd45a。同时,采用化学方法合成Gadd45a基因的干扰序列,经退火后克隆至pCDNA3 .0,命名为pC/ shRNA。实验结果证实重组质粒pC/ Gadd45a和pC/ shRNA构建成功。然后,将pC/ Gadd45a和pC/ shRNA转染L02细胞后发现,Gadd45a基因在mRNA水平和蛋白水平上分别提高表达和降低表达。Gadd45a真核表达载体
