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目的:鉴定小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的多分化潜能的起因。方法:从成年小鼠骨髓股骨、胫骨中分离MSCs,并进行原代培养,分别于0、2、4、6、8、10 d提取总RNA,通过RT-PCR检测多潜能特征基因和相关因子、3个胚层特征基因的mRNA的表达情况,以判断MSCs的特性。结果:小鼠MSCs中表达多能性标记基因Oct-4和nanog,并且表达与多能性相关的转录因子Klf4和c-Myc。外胚层的nestin、中胚层的SM22a和内胚层的CYP51标记基因均有表达。结论:贴壁纯化的小鼠MSCs除了具有多能
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第 卷 第 期 暨南大学学报医学版 VolNo
年 月
Journal of Jinan UniversityMedicine Edition
Apr
收稿日期
基金项目 国家自然科学基金项目 工程 期生物科学技术与生物医学工程建设项目
作者简介 黄伟 男硕士研究生研究方向生殖免疫与基因工程
通讯作者谢琪璇 女副研究员硕士生导师Tel E mail txqxjnueducn
小 鼠 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 多 潜 能 性 的 鉴 定
黄伟
谢琪璇
秦俊文
李威娜
张春雪
肖銮娟
暨南大学 生命科学技术学院 生殖免疫研究所再生医学教育部重点实验室 广东 广州
摘要目的 鉴定小鼠骨髓间充质干细胞MSCs的多分化潜能的起因 方法从成年小鼠骨髓股骨胫骨中
分离 MSCs并进行原代培养分别于 d 提取总 RNA通过 RTPCR 检测多潜能特征基因和相关因子
个胚层特征基因的 mRNA 的表达情况以判断 MSCs 的特性 结果小鼠 MSCs 中表达多能性标记基因 Oct4 和
nanog并且表达与多能性相关的转录因子 Klf4 和 cMyc 外胚层的 nestin中胚层的 SM22a 和内胚层的 CYP51 标记
基因均有表达 结论贴壁纯化的小鼠 MSCs 除了具有多能性的干细胞还可能含有各胚层的原始细胞
关键词骨髓间充质干细胞原代细胞培养RTPCR基因表达
中图分类号Q文献标志码A文章编号
The identification of multipotential in mouse bone
marrowderived mesenchymal stem cells
HUANG Wei
XIE Qixuan
QIN Junwen
LI Weina
ZHANG Chunxue
XIAO Luanjuan
Institute of Reproductive ImmunologyCollege of Life Science and Technology Key Laboratory
for Regenerative Medicine of Ministry of EducationJinan UniversityGuangzhou China
AbstractAimTo identify the cause of multidifferentiation potential in mouse bone marrow mesen
chymal stem cellsMethods MSCs were isolated from the femurs and tibiae of the adult mouse and cul
tured in vitroTotal RNA were extracted from the mouse bone marrow Day and cultured mouse MSCs
at and daysThe pluripotency marker genes Oct4 and nanogpluripotency related transcrip
tion factors Klf4 and cMyc and the marker genes of three embryonal layerssuch as CYP51SM22and
nestinwhich are typical genes specific for endodermmesoderm and ectoderm respectivelywere detected
by RTPCR in order to determine the characteristics of MSCsResults The results of RTPCR showed
that mouse MSCs can express mRNA of Oct4nanogKlf4 and cMycFurthermorein addition to SM22a
RTPCR revealed the presence of mRNA for CYP51 and nestin during the primary culture of mouse
MSCsConclusionMouse MSCs which were isolated by adhesion purificationmay be consist of pluripo
tent stern cells and primary cells from the three germ layers
Key wordsmesenchymal stem cellsPrimary cell cultureReverse transcription PCRGene
expression
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