Lactobacillus casei磷脂酶A2基因在大肠杆菌中的重组表达 (2014年)

以Lactobacillus casei染色体基因组为模板，PCR扩增获得磷脂酶A2基因pla2，以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒pET28a(+)pla2。通过IPTG诱导实现磷脂酶A2在E.coli DE3中的重组表达。对诱导条件初步优化后，重组菌酶活最大可达2.8 U/mL。通过Ni螯合柱对目的蛋白进行纯化，SDSPAGE分析重组磷脂酶A2相对分子质量为1.7×104。通过酶学性质分析，最适温度为37 ℃，最适pH 8，比酶活为110 U/mg。