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针对转基因水稻TT51-1插入的Bt 基因,扩增全长序列并克隆至pGEM-T 载体.测序验证后利用HindⅢ与BamHⅠ双酶切将Bt 基因定向插入pET-28a 载体.转化重组构建的pET-28a-cry 至BL21(DE3)宿主菌,在0.1mmol/LIPTG 诱导下获得以包涵体形式表达的目的蛋白.经SDS-PAGE 凝胶回收法获得相对分子质量约7.1×104的目的蛋白rCRY,为转基因作物检测新方法的开发提供了物质基础.
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