通过重叠延伸PCR扩增IL2-VP2串联基因,克隆到pMD18-T载体上,亚克隆正向插人到毕赤酵母表达质粒pPICZo:A中,经PCR和双酶切鉴定表明成功构建了酵母重组表达载体pPICZaA-IL2-VP2。将该重组质粒线性化后电击转化人感受态毕赤酵母X-33菌株,构建成分泌型表达IL2-VP2的酵母工程菌株。经甲醇诱导后,通过SDS-PAGE,Western-blot活性检测分析表明IL2-VP2基因长度为1. 85 kb,包含缺失了TAA终止密码子的IL-2基因和缺失了ATG起始密码子的VP2基因,两
