昆虫表达系统PPT课件.pptx

"昆虫表达系统PPT课件.pptx" 根据提供的PPT课件，以下是相关知识点的总结： 一、真核表达系统的种类 * 酵母 * 丝状真菌 * 昆虫 * 哺乳动物细胞 * 转基因动物 * 植物反应器 二、真核表达载体 * 质粒：真核表达元件、真核抗性 * 病毒载体：改建后 * SV40 病毒 * 腺病毒 * 反转录病毒 * 痘苗病毒 三、SV40 病毒 * SV40 病毒（Simian vacuolating virus 40 or Simian virus 40） * 基因组是一种环形双链的 DNA，基因组 5.2kb，病毒的直径 45nm，病毒成熟部位细胞核，无被膜，62 个核壳粒亚单位 四、病毒基因组的结构特点 * 病毒基因组大小相差较大，与细菌或真核细胞相比，病毒的基因组很小 * 病毒基因组可以由 DNA 组成，也可以由 RNA 组成 * 多数 RNA 病毒的基因组是由连续的核糖核酸链组成，病毒基因组的大部分是用来编码蛋白质的 * 噬菌体（细胞病毒）的基因是连续的；而真核细胞病毒的基因是不连续的，无内含子 * 基因重叠，即同一段 DNA 片段能够编码两种甚至三种蛋白质分子，病毒基因组 DNA 序列中功能上相关的蛋白质的基因或 rRNA 的基因往往丛集在基因组的一个或几个特定的部位，形成一个功能单位或转录单元，多顺反子 * 除了反转录病毒以外，一切病毒基因组都是单倍体，每个基因在病毒颗粒中只出现一次 五、构建真核表达系统 * 细胞必需表达元件 * 原核 DNA 序列 * 启动子 * 增强子 * 拼接信号 * 终止子和多聚腺苷化信号 * 筛选标记 * 动物病毒基因序列 六、病毒载体优点 * 真核细胞可识别的启动子 * 报告基因 * 感染周期，可持续复制 * 部分载体可整合入基因组 * 部分载体本身带有完整的复制及表达元件 * 部分载体具有宿主细胞特异性 * 识别受体 * 假病毒颗粒 七、昆虫杆状表达系统简介 * 杆状病毒是已知昆虫病毒中最大的类群，发现最早、研究最多且实用意义很大的昆虫病毒 * 杆状病毒载体系统主要分为两大类，一类是用于表达单个外源基因的载体，另一类是多元表达载体，用于插人并表达 2 个或多个外源基因 八、杆状病毒 _ 昆虫表达系统 * 杆状病毒基因组：闭环双链 DNA，88-166kb * 启动子：杆状病毒科核多角体病毒的多角蛋白强启动子 * 表达系统（两种） * 杆状病毒表达系统（BEVS） * 家蚕核型多角体病毒 - 家蚕表达系统 * 宿主：鳞翅目、膜翅目、双翅目、鞘翅目、直翅目、脉翅目、毛翅目的 600 多种昆虫 * 克隆基因方法：转移载体→共转染→同源重组→空斑筛选→纯化→重组病毒 九、昆虫杆状病毒表达系统的分子基础 * 目前已知基因组全序列的杆状病毒有苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（Ac MNPV）、家蚕核多角体病毒（BmNPV）、黄杉毒蛾多核衣壳核多角体病毒（OpMNPV）、舞毒蛾多核衣壳核多角体病毒（LdMNPV）、甜菜夜蛾多核衣壳核多角体病毒（SeMNPV）以及斜纹夜蛾核型多角体病毒（SplM t NPV）